| Posición | Carril | Nombre | Nacionalidad | Tiempo |
1 | 4 | Cristiano Sprenger | Australia | 58.79 |
2 | 3 | Cameron van der Burgh | Sudáfrica | 58.97 |
3 | 2 | Felipe Lima | Brasil | 59.65 |
4 | 6 | Damir Dugonjic | Eslovenia | 59.68 |
5 | 1 | Fabio Scozzoli | Italia | 59.70 |
6 | 8 | Kosuke Kitajima | Japón | 59.98 |
7 | 5 | Kevin Cordes | Estados Unidos | 1:00.02 |
8 | 7 | Nicolas Fink | Estados Unidos | 1:00.10 |
El récord mundial lo ostenta Jessica Hardy de Estados Unidos con un tiempo de 1:04.45 impuesto en los Estados Unidos durante el año 2009. Hoy 29 de Julio Ruta Meilutyte la ha bajado durante las semifinales, en Barcelona; el nuevo récord ha quedado en 1:04.35. El segundo mejor tiempo durante esta ronda fue para Yuliya Yefimova (Rusia) con 1:05.29; el tercer mejor tiempo,Rikke Møller Pedersen (Dinamarca) con 1:05.99.
| Posición | Carril | Nombre | Nacionalidad | Tiempo |
| 1 | 4 | Ruta Meilutyte | Lituania | 1:04.42 |
| 2 | 5 | Yuliya Yefimova | Rusia | 1:05.02 |
| 3 | 6 | Jessica Hardy | Estados Unidos | 1:05.52 |
| 4 | 3 | Rikke Møller Pedersen | Dinamarca | 1:05.93 |
| 5 | 2 | Breeja Larson | Estados Unidos | 1:06.74 |
| 6 | 7 | Viktoriya Solnceva | Ucrania | 1:06.81 |
| 7 | 8 | Marina García Urzainqui | España | 1:07.08 |
| 8 | 1 | Jennie Johansson | Suecia | 1:07.41 |
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